紫外线可以在蛋白质纯度测试中引入氧化产物

一项常规用于分析蛋白质的技术被发现是在引入人工制品。英国制药巨头阿斯利康(AstraZeneca)的科学家们发现，用于评估蛋白质或寡核苷酸等活性药物化合物纯度的高效液相色谱(HPLC)结合紫外和质谱(MS)会导致氧化杂质。

阿斯利康(AstraZeneca)的研究科学家弗里茨·施韦卡特(Fritz Schweikart)说:“当我们分析一种蛋白质时，发现它似乎含有大量氧化杂质。”“经过调查，发现这是紫外线探测器的结果。”

HPLC-UV-MS可以通过测量化合物对紫外光的吸收来记录化合物的含量，而结构特征则通过质谱来确定。然而，Schweikart的调查表明，现代紫外检测技术可能是严重氧化人工制品的来源。

Sabeth Verpoorte荷兰格罗宁根制药研究所的药物分析教授说，这是一个重要的发现，因为“氧化效应发生在蛋白质和肽样品中——这是MS经常使用的样品类型”。她补充说，研究人员仍然需要意识到测量背后的基本原则——“我们还没有到可以将这些仪器视为黑盒的地步”。

Schweikart的工作表明，当使用这种技术时，易受紫外线降解的化合物在高浓度下分解，而在紫外线下稳定但对自由基诱导的降解敏感的化合物也会受到影响。Schweikart解释说，后者包括多肽、蛋白质、寡核苷酸和小分子，“这对我们来说是最大的惊喜，因为在紫外线探测器中形成的流动相中自由基的降解从未被描述或警告过。”

Schweikart警告说，使用HPLC-UV-MS的研究人员需要注意氧化效应，如果观察到杂质，需要关闭UV灯重新运行样品。他还建议平行连接UV和质谱，而不是串联。

虽然这些结果很重要，但他们并没有对这项技术的可靠性产生严重的怀疑。对于Verpoorte来说，“使用这项技术的研究人员可能会获得额外的见解，以解释他们以前无法很好地解释的结果。”

斯韦卡特认为他们的发现是一个机会。他说:“我们认为这是研究激进化学的一种令人兴奋的新可能性。”“只要多发性硬化症患者群体意识到这种影响，这只是另一种选择。”