的形象一个blob题为CD20受体的上半部分被称为衍射极限,ispixellated灰度和底部贴上DNA-PAINT是红色和黑色更清晰。角落里有一个5微米尺度。

来源:2023年©莱因哈特et al,自然

新Resi显微镜技术能大大提高分辨率,即使在超分辨率显微镜。这里显示了CD20受体使用普通光学显微镜(上)和Resi

创建了一种光学显微镜技术可以区分微小物体小于1海里。这一技术能够活细胞比以往更详细地查看。

由连续成像的新方法,称为分辨率增强(Resi),意味着荧光显微镜的分辨能力现在可以首次在埃范围内运作。传统超分辨率显微镜可以区分对象之间相隔15到20海里,但这并不直接转化为细胞实验。当超分辨率显微镜出现革命性的在生命科学领域,它开发人员在2013年获得了诺贝尔化学奖

与现有技术相比,Resi涉及标签相邻的副本相同的目标分子与一个不同的标记。研究人员表明,当每一个标签都被照亮了,它们可以明确区分的,即使密集在一起,按顺序通过成像。

从每个标记分子,通过收集多个信号的平均位置可以确定每组相比具有更高的精度水平可能与一个单一的标记分子,获得“超级分辨率”形象。

使用这种技术,研究人员表明Resi可以区分两个标记几个原子,或者不到一个纳米,在工程结构的DNA。他们也能够标签和图像CD20,一种有针对性的抗癌药物利妥昔单抗的蛋白质。通过映射CD20的分子排列在治疗和药物治疗细胞原位,Resi能够揭示新信息的蛋白质是如何安排,如何安排是影响绑定的药物。

一个图显示两个堆栈。2分子都有一个较低的位置。第一个栈顶层有许多重叠的地方。第二个栈2中间层检测每个分子之一,所以它的顶层显示每个平均位置

资料来源:©2023年Springer自然有限

在一群技术称为本地化显微镜(左),所有感兴趣的分子的副本都贴上了标签与荧光照亮(眨眼),一次几。在许多重复的位置可以找到许多分子的平均位置眨眼(每个闪烁显示为灰色点)。然而,眨眼从约10到20海里内标记分子相互重叠,很难区分单个分子。Resi(右),相邻的副本相同的目标分子与不同的标签,每个标签使眨眼从密集分化的分子成像在不同时期。标记分子小于1海里除了可以区分

使用Resi,研究人员能够解决DNA折纸结构和超过2000,另外,1000年核孔约67µm地区复杂的蛋白质2在100分钟。他们补充道,这使这项技术适用于细胞生物学的“足够高通量的工具”。

然而,限制结构的方法是观察到Resi仍然必须保持足够长的时间来收集准确信息。对于一些生物实验这意味着细胞必须固定,可以引入结构变形和防止动态过程形象化。

标签的大小也是一个限制因素,因为它的位置观察荧光标记的一部分,而不是感兴趣的分子标记连接。

一个椭圆形的小环一个插图在500 nm范围内所示。完整的图像有5微米尺度分为有限衍射区域灰度和模糊的。较低的部分是贴上DNA-PAINT是黑色和红色和尖锐

来源:2023年©莱因哈特et al,自然

核孔复合物显示使用常规光学显微镜(顶部)和Resi,展示了特殊决议的蛋白质,可以实现

尽管如此,研究人员说,Resi可以作为预审方法个性化治疗和药物设计的可能是一个工具。

Resi是…准备关闭之间的差距3 d超分辨率荧光显微镜在整个完整的细胞和低温电子显微镜结构独立超分子配合物的研究,介绍一种范式转移的荧光成像技术将光学显微镜埃决议。

我们非常兴奋Resi的发展,——第一次——允许研究人员解决sub-nanometre距离使用现成的工具,”说拉尔夫Jungmann组长马克斯普朗克研究所的生物化学和该研究的作者之一。这是光学显微镜的范式转变,使分子内超分辨率显微成像和关闭差距和结构生物学研究。Resi准备交付信息了解复杂生物系统的关键。

小林南助理俄勒冈健康与科学大学的生物医学工程教授,告诉manbetx手机客户端3.0Resi是“非常令人兴奋”。“我相信方法代表了在生物成像一个主要的进步产生了重大影响在结构生物学等生命科学的许多领域,”他补充道。