癌症生物标记物用肉眼统计

癌症生物标记物现在可以用肉眼检测和计数了吗．这项新技术使用转基因荧光病毒来标记疾病的生物标志物，使它们能够被肉眼发现，其准确性可与定量聚合酶链式反应(qPCR)相媲美，后者是目前的金标准。最重要的是，研究人员声称这种技术更便宜、更容易执行，而且没有假阳性的风险。

微RNA (miRNA)是一种短长度的RNA，一些癌细胞会将其释放到血液中，在血液中它们被认为有助于转移。特定的miRNAs可以作为特定癌症的指纹。Attomolar (10^-18年M)的浓度可以通过qPCR在临床上检测和量化，在一系列重复的加热和冷却循环中，RNA被酶扩增，并在RNA扩增时实时检测产物。然而，这种方法有几个缺点，特别是一个序列相对于另一个序列的选择性放大可能导致假阳性。

中国南京东南大学的科学家及其中国和美国的同事设计了一种检测mirna的新技术，该技术使用基因工程的T7噬菌体(一种只攻击细菌的病毒)，一端是荧光绿色蛋白，另一端是金结合蛋白。然后，他们将这些噬菌体添加到带有寡核苷酸标记的金纳米颗粒(GNPs)溶液中，该寡核苷酸与一种名为let-7a的miRNA(一种非小细胞肺癌的生物标志物)的一端结合。另外，研究人员用数百个寡核苷酸序列副本将磁性微粒(MMPs)功能化，这些寡核苷酸序列将结合该miRNA的另一端。然后，他们将噬菌体标记的GNPs和MMPs一起孵育在含有癌症miRNAs的溶液中。

如果癌症生物标志物存在，噬菌体标记的GNPs和MMPs结合到miRNA的相反端，导致let-7a充当胶水，将数百个GNPs粘在每个MMP上。如果特定的miRNA不存在，这两个粒子就没有关联。然后，研究人员将MMPs与任何结合的GNPs一起从溶液中磁性分离出来。最后，噬菌体从GNPs中释放出来，并在宿主细菌培养基上培养。

点计数

每个荧光噬菌体病毒在细菌培养基上繁殖，形成一个单独的空斑。3小时后，只需用紫外线照射斑块并计数绿色斑点，就可以用肉眼计数斑块。样本中存在的每个噬菌体在分离前都与样本溶液中的一个miRNA相关联，因此研究人员可以使用宿主培养基上的病毒空斑数量来计算miRNA的浓度。此外，当研究小组在没有miRNAs的情况下进行对照实验时，在宿主细菌培养基上没有发现斑块。研究人员说，这证明了与qPCR不同的是，他们的新测试没有假阳性的风险。

研究人员还声称，这项技术比qPCR更简单、更便宜:“对于这项技术，我们不需要专门的设备，不像qPCR，”生物化学家说Chuanbin毛俄克拉荷马大学和浙江大学毛说，传统的qPCR检测一个样本的成本约为120美元(77英镑)，而他的技术只需要大约30美元。进一步的测试表明，该技术可以用于测试同一样本中的多个mirna，并且对真实的组织样本也有效。

Bio-analytical化学家格雷戈里·韦斯他说:“他们在利用病毒建立检测方案方面提出了真正的创新。”然而，他对研究人员声称该技术将更容易、更便宜或与qPCR一样快的说法表示怀疑。“这里有很多专业步骤，比如磁珠捕获，你如何执行这些步骤会影响结果。”谈到成本，他说:“我们用金纳米颗粒和磁性微粒做了一些研究，这些东西都非常昂贵，而(qPCR中使用的试剂)如今在实验室里只是普通产品。”尽管如此，他说:“qPCR是依赖于序列的，有时它就是不能识别序列，所以我认为在某些时候这肯定是有用的。”